Effetto di HGF sullo sviluppo di follicoli bovini preantrali in un modello di coltura senza siero a due steps
Nel corso dell'ovogenesi l'interazione tra la componente somatica (cellule della granulosa e della teca) e quella germinale (ovocita) del follicolo ovarico, è regolata da fattori paracrini ed autocrini e da interazioni tra cellule della granulosa ed ovocita al fine di produrre una cellula uovo matura.
Negli ultimi anni ampio interesse ha avuto la coltura in vitro di follicoli ovarici preantrali sia allo scopo di ottenere un maggior numero di ovociti in grado di andare incontro a maturazione, fecondazione e sviluppo di un embrione sia per valutare il ruolo di fattori paracrini ed autocrini, quali GH, IGFS, EGF e peptidi quali attivina, inibina e follistatina, in aggiunta alle gonadotropine, nella maturazione del follicolo e dell'ovocita. L'identificazione degli effetti e dei meccanismi di azione di queste sostanze è estremamente importante per la definizione delle condizioni di coltura idonee ad ottenere una corretta maturazione nucleare e citoplasmatica degli ovociti, e quindi una miglior resa di fecondazione ed impianto.
Il modello bovino presenta notevoli somiglianze con la donna nella sua fisiologia della riproduzione, per cui con questo progetto intendiamo estendere al bovino la ricerca già attiva nel nostro laboratorio sull'azione dell'HGF (hepatocyte growth factor) sull'accrescimento e la maturazione del follicolo ovarico nel modello murino.
Gli aspetti da studiare sono: 1) l'attivazione dei follicoli primordiali; 2) accrescimento, formazione dell'antro follicolare e successiva maturazione dell'ovocita.
Il corretto accrescimento sarà valutato sia dal punto di vista morfologico anche con l'utilizzo di anticorpi specifici che possano individuare proliferazione e/o apoptosi sia da un punto di vista molecolare andando a studiare l'espressione genica di geni legati alla maturazione del follicolo e dell'ovocita quali: Kit-Ligand 1-2, FSH-R, VEGF, AMH and P450 aromatase nella granulosa e GDF9 negli ovociti.