Le dislipidemie sono il maggiore fattore di rischio per l'aterosclerosi e la malattia coronarica. Uno dei fattori maggiormente coinvolti nelle dislipidemie è l'Angiopoietin Like 3 (ANGPTL3), un fattore circolante secreto dal fegato,coinvolto nel metabolismo lipidico. Esperimenti di sequenziamento del genoma hanno rivelato che le varianti geniche di LOF nell'ANGPTL3 causano un raro disturbo recessivo noto come ipobetalipoproteinemia familiare (FHBL2). I soggetti FHBL2 mostrano un fenotipo lipidico plasmatico distinto che include livelli molto bassi di VLDL, LDL e HDL, bassi livelli di TG e colesterolo. Diversi studi in vitro e in vivo hanno dimostrato il suo ruolo nella regolazione del metabolismo lipidico, poichè inibisce la lipoproteina lipasi (LPL), con il conseguente effetto sui livelli di TG, e la lipasi endoteliale (EL), influenzando i livelli di HDL-c. Uno studio recente ha dimostrato che la delezione dell'ANGPTL-3 determina ridotti livelli di LDL-c attraverso un meccanismo di riduzione della secrezione di ApoB e aumentato assorbimento di lipoproteine contenenti ApoB, causati dall'aumentata espressione di LDR (recettore LDL)e LRP1 (proteina 1 correlata all'LDLR) . Lo scopo di questo progetto è quello di chiarire il meccanismo molecolare attraverso cui ANGPTL3 influenza l'espressione dei due recettori LDLR e LRP1. Gli esperimenti saranno eseguiti utilizzando la linea cellulare di epatocarcinoma umano HepG2 , in cui verrà silenziata la proteina ANGPTL3 e, utilizzando tecniche di Western blot e di RT-qPCR saranno valutati gli effetti sull'espressione a livello proteico e di mRNA dei recettori LDLR e LRP1 rispetto alle cellule di controllo. Sarà poi valutata l'espressione (proteina e mRNA)di PCSK9, che regola la degradazione di entrambi. I risultati ottenuti porteranno ad indagare i fattori coinvolti nella modulazione di queste 3 proteine, analizzandone l'espressione ed eventuali interazioni con ANGPTL3 attraverso esperimenti di immunoprecipitazione.
Diversi studi hanno dimostrato il ruolo di ANGPTL3 nell'inibire LPL ed EL, ma non hanno spiegato il suo effetto sui livelli di LDL-c. Lo studio recente di Xu et al (2018) ha dimostrato che la delezione dell'ANGPTL-3 causa la riduzione dei livelli di LDL-c attraverso un duplice meccanismo di riduzione della secrezione di ApoB e di lipoproteine contenenti ApoB, causate dall'aumentata espressione di LDLR e LRP1. In questo contesto, il presente progetto si propone di andare a investigare i meccanismi molecolari dell'interazione ANGPTL-3/LDLR/LRP1, meccanismi al momento ignoti e di forte interesse per la conoscenza approfondita delle cause della dislipidemia, fondamentale per la messa a punto di nuove cure.