Le reazioni che coinvolgono le biomolecole, comprese le interazioni e i cambiamenti conformazionali possono essere studiati utilizzando la calorimetria isotermica di titolazione (ITC).
L'ITC è l'unica tecnica che permette di determinare, con un unico esperimento, tutti i parametri di binding molecolare senza la necessità di modificare le molecole mediante marcatura o immobilizzazione. La tecnica misura l'interazione tra le componenti nel loro stato nativo. La misura del calore, generato o assorbito durante un’interazione tra due sostanze, permette l'accurata determinazione di costanti di legame (KD) nel range millimolare-nanomolare (10-2 to 10-9 M), stechiometria di reazione (n), entalpia (ΔH) ed entropia (ΔS), fornendo così un profilo termodinamico completo dell'interazione molecolare in un singolo esperimento. Tramite questa tecnica abbiamo potuto quantificare l’affinità di legame tra proteine e ligandi di interesse biologico, determinare la specificità di legame e la stechiometria della reazione caratterizzando così il meccanismo della reazione, fare misure di cinetica enzimatica e confermare gli obiettivi di legame previsti nella scoperta di farmaci a piccole molecole. La calorimetria isotermica di titolazione può anche essere usata per misurare cinetiche enzimatiche, interazioni con nanomateriali e, potenzialmente, qualsiasi fenomeno di interazione tra componenti in soluzione.
Nel laboratorio sono presenti un MicroCal iTC200 e un MicroCal PEAQ-ITC. Il MicroCal PEAQ-ITC è la nuova piattaforma di calorimetria isotermica di titolazione ultrasensibile, è eccezionalmente sensibile ed è la più alta sul mercato per un sistema di questo tipo. MicroCal PEAQ-ITC ha il miglior rapporto segnale/rumore per questa categoria di strumenti garantendo una elevata affidabilità dei dati di affinità e dei profili termodinamici ottenuti.
