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Da quando è stata ipotizzata per la prima volta dal chimico tedesco Emil Fisher, la total synthesis di peptidi e proteine ha suscitato un sempre maggiore interesse. Tanto che, negli ultimi anni, è diventata una procedura sempre più utilizzata dall¿industria biofarmaceutica, anche grazie ai recenti sviluppi della solid phase peptide synthesis (SPPS), inizialmente sviluppata da Merrifield. Il problema principale della SPPS, che non si osserva in altri metodi di produzione, come i metodi biotecnologici del DNA ricombinante, è la formazione di impurezze diastereoisomeriche. Tali impurezze possono formarsi a causa della bassa purezza enantiomerica degli aminoacidi utilizzati come sintoni chirali, o per la naturale tendenza di alcuni aminoacidi a racemizzare, anche se già inseriti nella struttura peptidica. Il problema delle impurezze diastereoisomeriche non è da sottovalutare, il monitoraggio della stereochimica dei reagenti amminoacidici e dei peptidi è, quindi, un punto essenziale nel corso della sintesi del peptide, per assicurare la piena integrità strutturale del prodotto finito e il suo utilizzo in terapia. Tale controllo può essere effettuato solamente attraverso la separazione cromatografica, le impurezze diastereoisomeriche e il prodotto peptidico di interesse sono isobari, quindi non discriminabili attraverso l¿utilizzo di tecniche solitamente selettive come la spettrometria di massa. In questo lavoro vogliamo proporre metodi analitici che permettano di controllare l¿intero work-flow sintetico: dalla purezza enantiomerica dei reagenti chirali, all¿analisi del prodotto finito, in modo da controllare la formazione delle impurezze diastereoisomeriche. In entrambi casi si esalterà la velocità delle analisi cromatografiche, sviluppando metodologie cromatografiche innovative per rispondere alle maggiori criticità che si possono incontrare.