Il pesce zebra (PZ, Danio rerio) è un piccolo ciprinide d'acqua dolce sempre più utilizzato in numerosi ambiti della ricerca scientifica. Esso è uno dei modelli di punta per l'analisi del sistema visivo dei vertebrati ed è un ottimo modello di studio traslazionale verso l'uomo. Per lo studio del sistema visivo del PZ sono disponibili vari approcci metodologici: genetici, di biologia molecolare, proteomici, immunoistochimici e comportamentali.
Il BDNF è un'importante neurotrofina che nell'occhio esercita un ruolo neuro-protettivo nei confronti delle cellule gangliari della retina ed è essenziale per il loro corretto sviluppo e mantenimento. Il BDNF non solo promuove la sopravvivenza delle cellule gangliari ma gioca un ruolo importante nel preservare l'integrità strutturale e la risposta visiva di questi neuroni.
Il presente progetto si propone di utilizzare una linea knock-out BDNF -/- (KO) di PZ per indagare il ruolo del BDNF nello sviluppo e nella funzionalità dell'occhio. I PZ KO costituiscono un ottimo modello per lo studio del BDNF nell'occhio della larva e dell'adulto essendo vitali fino alla fase adulta, a differenza dei KO di topo che muoiono durante lo sviluppo postnatale precoce.
Lo scopo principale del progetto è quello di effettuare uno studio comparativo tra l'occhio dei WT e dei KO per verificare se la mancata espressione di BDNF influenza il suo sviluppo e la capacità visiva. Si adotterà un approccio multidisciplinare comprendente la comparazione dell'intero proteoma dell'occhio di individui WT e KO sia in larve che in adulti. Le alterazioni di espressione proteica più significative verranno validate mediante l'analisi dell'espressione dei geni relativi tramite Real-time PCR. L'anatomia microscopica dell'occhio di WT e KO verrà indagata mediante analisi istologiche e immunoistochimiche. Infine, verranno effettuati test comportamentali già validati nel PZ per valutare la funzione visiva nelle larve dei soggetti WT e KO.
